2000年，杨俊毅加入海南周易影视制作公司，出演武侠剧《武林外史》，饰演搞笑活宝小四。2001年，杨俊毅与吴奇隆、朱茵合作出演武侠剧《萧十一郎》，在里面饰演仁慈挚诚的灵鹫；与张智尧合作主演功夫电影《地上最强》。2002年，杨俊毅与于波、吴晓敏合作主演偶像剧《水晶之恋》，饰演叛变却盼望爱的少年杨俊逸 。2003年，杨俊毅与于波、蔡少芬合作主演奇幻武侠剧《水月洞天》、《水月洞天Ⅱ灵镜传奇》，饰演痴情族长童战 。2005年，杨俊毅与于波、吕良伟合作主演武侠剧《把酒问青天》，饰演幽冥少主余火莲 。2007年，杨俊毅参加综艺节目《全明星音雄会》总决赛，获得第六周的周冠军 ；与于波、秦沛合作主演电视剧《李卫辞官》，饰演傅恒 。2008年，杨俊毅参演数字电影《神医安道全》，饰演大侠追风 ；与于波、刘园园合作主演的缉毒题材电视连续剧《迅雷急先锋》播出，饰演一个受贩毒分子引诱、逐渐陷入毒品深渊的大学生华震 。2009年，杨俊毅与李绮红、于波、陈浩民合作主演的喜剧《包三姑外传》 ，以及和徐峥、于波等主演的电视剧《大内低手》先后播出。2010年，杨俊毅退出演艺圈，投入江苏的武术事业，其徒弟张凯在2011年10月世界武术锦标赛男子组长拳比赛中夺冠。