1989年，参加“韩国小姐”选美比赛，获得亚军，后进入演艺界 。1991年，参演《黎明的眼睛》 。 1995年，高贤贞与崔民秀、朴相元、李政宰出演了电视剧《沙漏》 。2004年，高贤贞复出，与池珍熙、赵寅成主演爱情剧《春日》，饰演一位患有失语症的美丽少女，和赵寅成谈起了名副其实的“姐弟恋”。同年，高贤贞成为了通讯公司的品牌代言人，签下了10亿韩元的合同 。2005年，高贤贞与千正明主演了由权锡璋执导的爱情喜剧《狐狸啊，你干啥呢》，在剧中，高贤贞剪短了头发，饰演一个对爱情充满幻想的高龄三流杂志女记者，和千正明饰演的汽车工人相遇产生了色彩斑斓的爱情故事 。2006年，主演了由洪尚秀执导的爱情喜剧《海边的女人》，获得第43届韩国百想艺术大赏和第44届大钟奖最佳新人女演员奖 。2007年，高贤贞与河正宇主演刑事剧《H.I.T》，饰演HOT女刑警队长，剧中中性化的装扮，高大的嗓门，不拘小节又柔中带刚的形象让高贤贞的角色更加立体生动 。 2008年，高贤贞转投以主持人为主的Workwonders经纪公司，开始了主持方向的努力 。同年，参加了《黄金渔场》，开辟自己综艺的道路 。2009年，与严泰雄出演《善德女王》，饰演与女王争夺权力的死对头美室宫主，获得第46届韩国百想艺术大赏电视类奖项最佳女演员奖提名 。同年，与崔智友、金玉彬、金敏熙、李美淑出演影片《女演员们》 。2010年，高贤贞与李秀景、权相宇主演了由朴人权大画家的漫画原作改编的电视剧《大物》，挑战女性总统角色，该剧讲述的是发生在韩国第一任女总统身边的阴谋与感情故事，剧中的女主角是一个智慧与美貌并重且有领袖风范的人物 。2011年，出演了由洪尚秀自编自导的影片《北村方向》，扮演了“成俊”的疯狂影迷，该片讲述的是曾经做过电影导演的“成俊”探访居住在首尔市北村的学长时发生的有趣故事 。2012年，高贤贞变身主持人，于SBS电视台主持脱口秀节目《Go Show》 。2013年，高贤贞与李基英主演水木剧《女王的教室》，在剧中饰演一名严格对待每一位学生，展现出绝对威严的女教师 。2016年3月，为拍摄全新电视剧《Dear My Friends》前往东欧取景 。