蒋勤勤生于重庆市南岸区，6岁就读于重庆弹子石小学，10岁考入重庆艺术学校学习京剧。艺校毕业后，蒋勤勤进入重庆京剧团。第一次触电是1992年重庆电视台拍摄的电视剧《媚态观音》。1994年以全国艺术成绩第一名的考取北京电影学院。在北京电影学院94表演班就读时，大一拍《西施》，大二拍《小凤仙传奇》，大三拍《苍天有泪》，大四拍《苏州二公差》。1998年自北京电影学院毕业后，被分配到北京电影制片厂。 1998年出演琼瑶编剧的电视剧《苍天有泪》 该剧由蒋勤勤、庹宗华、朱茵、焦恩俊，等两岸三地演员联袂主演的一部爱情电视剧。该剧使得正在读大三的蒋勤勤迅速走红 。1999年出演电视剧《白发魔女》，该剧是根据梁羽生的武侠小说《白发魔女传》改编，由蒋勤勤、张智霖、等联袂主演。 2000年出演电视剧《卧虎藏龙》饰演玉娇龙。该剧由邱心志、何润东、蒋勤勤及黄奕领衔主演 。同年出演电视剧《青河绝恋》，又名《新一剪梅》，是一部由赵文卓、蒋勤勤、刘锡明、王艳、邢岷山等主演的年代悲情剧，引发了两代人一系列爱恨情仇的故事。 2001年出演电视剧《射雕英雄传》饰演穆念慈。同李亚鹏、周迅、周杰等人共同主演。 同年与赵文卓、何润东主演电视剧《风云雄霸天下》和《风云必胜》饰演明月和第二梦。2002年与林心如、谭耀文主演电视剧《半生缘》，扮演风尘女子顾曼璐。《半生缘》是根据张爱玲同名小说改编。 2002年客串出演《还珠格格Ⅲ》饰演江南名妓夏盈盈。 2004年在电影《姐姐词典》饰演牛红梅，获第10届中国电影表演艺术学会奖“金凤凰奖”。 2006年，与陈建斌、马伊琍主演中国内地电视剧《乔家大院》，此剧曾被香港无线电视、台湾、韩国播映，并获第23届中国电视金鹰奖优秀长篇电视剧奖和2007年第26届中国电视剧飞天奖优秀长篇电视剧一等奖。 2007年与黄磊主演《四世同堂》，《四世同堂》是蒋勤勤产后首部作品，剧中她饰演祁家长孙儿媳韵梅，并自化妆，感受她饰演角色的温润贤良。 2014年10月，家庭伦理情感大戏《田姐辣妹》开机，蒋勤勤饰演既是姐姐又是妹妹的老二田佳慧 。2015年，同陈建斌共同主演电影《一个勺子》，11月20日上映 。而在电影上映后，蒋勤勤“女神变村妇”更是引起了网络热议，并以在《一个勺子》中颠覆形象的出演，获“东京国际电影节·中国电影周”最佳女主角奖 。11月在电视剧《九州·海上牧云记》中饰演母仪天下的南枯皇后 。